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    細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么選?一文助您徹底擺脫選擇困難癥。

    最近有不少小伙伴咨詢,你們這個(gè)SmartCell 600、800和900有什么區(qū)別?還有更直接的,那臺紫色怪好看的,跟阿藍(lán)和小綠有什么區(qū)別?看似外觀形狀相同,儀器顏色和軟件界面卻有很大差別,當(dāng)然啦,他們檢測的細(xì)胞類型又有差異,在各自應(yīng)用領(lǐng)域發(fā)光發(fā)熱!

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    那么如何根據(jù)自己的需求來選一款稱心如意的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀呢?


    1、測試細(xì)胞類型


    在選擇儀器之前,我們首先要思考兩個(gè)問題:


    1、自己的細(xì)胞房培養(yǎng)哪些細(xì)胞?


    一般實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞房培養(yǎng)的大多為常規(guī)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞系,比如腫瘤細(xì)胞、動物哺乳細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞等,這類細(xì)胞直徑范圍在5-40μm。


    還有一些可能是從組織或血液分離的原代細(xì)胞,比如脾細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、臍帶血或骨髓源的原代間充質(zhì)干細(xì)胞等;這類細(xì)胞組分復(fù)雜,可能有組織碎片、血小板、紅細(xì)胞等雜質(zhì)干擾 。


    最后呢,還有一些老師在某些細(xì)分領(lǐng)域計(jì)數(shù)需求,比如酵母細(xì)胞、球藻細(xì)胞、芽孢桿菌等微生物小粒徑細(xì)胞(1-10μm),甚至低于1μm 的大腸桿菌 。

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    CHO細(xì)胞

    (10-20μm)

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    T細(xì)胞

    (6-10μm)

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     酵母細(xì)胞

    (2-6μm)

    我們根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞類型的直徑大小,第一步要確認(rèn)合適的物鏡放大倍數(shù),就跟在顯微鏡下有4X、10X、40X和100X不同放大倍數(shù)一樣,需要選擇一個(gè)正確的物鏡來滿足成像清晰和識別。正常的細(xì)胞系和原代細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用5X物鏡光學(xué)放大就可滿足,針對酵母和球藻以及一些粒徑更小的微生物樣本,需要用到10X甚至20X物鏡才能夠看的清晰。

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    5倍放大

    酵母細(xì)胞

    10倍放大

    酵母細(xì)胞

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    2、細(xì)胞分析是關(guān)注細(xì)胞活率還只是細(xì)胞濃度?

    細(xì)胞計(jì)數(shù)儀分為明場款(激發(fā)光為白光)和熒光款(不同顏色的激發(fā)光),其中明場包括非臺盼藍(lán)染色和臺盼藍(lán)染色,如果您平時(shí)只關(guān)注細(xì)胞濃度,這時(shí)選一款明場計(jì)數(shù)儀即可滿足需求。那如果細(xì)胞濃度和細(xì)胞活率都關(guān)注,我們就需要考慮用經(jīng)典臺盼藍(lán)染色還是AO(吖啶橙)/PI(碘化丙啶)雙熒光染色分析。

    臺盼藍(lán)和熒光染色比較


    _

    臺盼藍(lán)染色

    AO/PI熒光染色

    原理

    細(xì)胞膜的通透性

    (非特異性染色)

    核酸染色

    (特異性染色)

    識別區(qū)分

    活細(xì)胞:不染色

    死細(xì)胞:藍(lán)色

    活細(xì)胞:綠熒光

    死細(xì)胞:紅熒光

    適用范圍

    常規(guī)傳代培養(yǎng)細(xì)胞

    細(xì)胞系、原代細(xì)胞、免疫細(xì)胞等

    臺盼藍(lán)染色

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    AO/PI雙熒光染色

    當(dāng)然,除了臺盼藍(lán)和AO/PI雙熒光染色之外,還可以通過AO/DAPI染色,DAPI染色可以標(biāo)記所有細(xì)胞核,可能在特定條件下染色死細(xì)胞。PI相比DAPI染死細(xì)胞則更為專一,用于標(biāo)記失去膜完整性的死細(xì)胞。針對細(xì)菌的活率分析,還可以通過SYTO-9/PI染色,SYTO-9是一種能夠透過細(xì)胞膜的綠色熒光核酸染料,可用于細(xì)菌的RNA和DNA染色。


    2、測試數(shù)據(jù)的可靠性


    在完成第一步選擇后,接下來需要選擇一個(gè)檢測數(shù)據(jù)可靠的計(jì)數(shù)儀,無論它功能多么強(qiáng)大,數(shù)據(jù)可靠性是關(guān)鍵的,它主要體現(xiàn)在測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。


    其中準(zhǔn)確性是測試值與真實(shí)值之間的差異,我們一方面可以通過與人工血球計(jì)數(shù)對比,相同的一管細(xì)胞樣本,通常要求計(jì)數(shù)儀與人工之間的計(jì)數(shù)誤差在10%以內(nèi);另一方面可以用標(biāo)準(zhǔn)品(不同濃度、直徑和活率的標(biāo)準(zhǔn)品)進(jìn)行驗(yàn)證;要求更高的用戶會請第三方計(jì)量公司進(jìn)行再次計(jì)量驗(yàn)證,最后結(jié)合自己的細(xì)胞進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證,通過以上多重驗(yàn)證,最后確定儀器的準(zhǔn)確性 。


    其次,穩(wěn)定性通常我們可以對同一個(gè)樣品進(jìn)行幾組平行測試,或者對同一個(gè)高濃度樣品做梯度稀釋分析線性關(guān)系,這里面有一個(gè)重要的參數(shù)CV值(變異系數(shù)),一個(gè)可靠的計(jì)數(shù)儀,在合適的濃度范圍內(nèi),通常CV值<5%。

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    決定一個(gè)計(jì)數(shù)儀數(shù)據(jù)可靠性,主要有以下兩個(gè)方面:


    硬件 包括光路系統(tǒng)、成像系統(tǒng),其中成像的像素決定圖片的清晰度,從而影響到識別結(jié)果;配置越高,成像越清晰;其次是自動化過程,這里面包括進(jìn)樣、對焦、曝光等參數(shù),全自動過程能減少人為操作帶來的誤差,從而提高檢測數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性,

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    低像素,成像模糊

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    高像素,成像清晰

    軟件算法   在獲得一張高質(zhì)量圖片之后,要對其進(jìn)行算法識別分析,目前主要基于兩種算法,一種是基于灰度值(普通算法),另外一種是基于深度學(xué)習(xí)人工智能算法(AI算法),這種先進(jìn)算法相對于普通算法,能夠?qū)蹐F(tuán)細(xì)胞精準(zhǔn)分割,對不規(guī)則細(xì)胞精準(zhǔn)識別,對含有細(xì)胞碎片、雜質(zhì)等復(fù)雜樣本精確計(jì)數(shù),這種算法能夠?qū)崿F(xiàn)不同領(lǐng)域、不用應(yīng)用場景的計(jì)數(shù)分析。萌薇生物也是國內(nèi)早期將AI技術(shù)應(yīng)用在細(xì)胞計(jì)數(shù)領(lǐng)域并進(jìn)行儀器開發(fā)的廠家。


    3、檢測效率


    傳統(tǒng)的血球計(jì)數(shù)法能夠不斷被智能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀替代,其中檢測效率是一個(gè)非常大的因素,如果您每天檢測的細(xì)胞樣本量多,檢測效率相當(dāng)關(guān)鍵,一個(gè)優(yōu)秀的計(jì)數(shù)儀,不僅準(zhǔn)和穩(wěn),快也很重要。檢測效率主要包括以下兩點(diǎn):


    單個(gè)樣品檢測時(shí)間:通常檢測一個(gè)樣品,人工計(jì)數(shù)時(shí)間在3-5分鐘,計(jì)數(shù)儀在10秒到2分鐘時(shí)間不等,產(chǎn)生差異的原因主要是儀器的自動化程度,尤其是手動進(jìn)樣和手動調(diào)焦會直接影響到計(jì)數(shù)的效率,其次是算法分析的時(shí)間也有差異,例如先進(jìn)的AI算法將直接縮短處理圖片的時(shí)間,這也是為什么萌薇計(jì)數(shù)儀實(shí)現(xiàn)測試分析速度快的重要原因。

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    計(jì)數(shù)板通量:一塊血球計(jì)數(shù)板有兩個(gè)加樣孔槽,市面上絕大數(shù)計(jì)數(shù)儀也是采用兩個(gè)通量,當(dāng)我們樣本量比較多時(shí),就需要更高通量的計(jì)數(shù)板,一次性可以同時(shí)測多少樣品,這也是決定效率的一個(gè)因素。萌薇計(jì)數(shù)板采用6樣品孔設(shè)計(jì),不僅在提高效率的同時(shí),還一定程度降低了測試成本。

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    4、其他因素


    除了以上三點(diǎn)以外,還有一些其他因素也得考慮:

    機(jī)型--分體機(jī)還是一體機(jī),主要根據(jù)細(xì)胞房空間大小來選擇,分體機(jī)需要連接電腦,一體機(jī)則包含顯示屏,可直接操作,相對分體機(jī)價(jià)格要高一些,但使用起來簡單方便。


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    軟件分析功能--一臺優(yōu)秀的計(jì)數(shù)儀在完成基本的參數(shù)(細(xì)胞濃度、活率、直徑、圓度、聚團(tuán)率)分析功能之后,還要具備對測試數(shù)據(jù)的整理和分析,包括直徑分布圖、測試數(shù)據(jù)再分析、數(shù)據(jù)對比分析(CV值計(jì)算)、增殖曲線等分析功能;滿足JPG、EXCEL、PDF等多種格式的數(shù)據(jù)輸出方式,不僅能通過U盤輸出還可以通過服務(wù)器輸出;數(shù)據(jù)的備份和恢復(fù)也是必要的,保障用戶的數(shù)據(jù)萬無一失;除此之外,稀釋計(jì)算器和傳代計(jì)算器會讓您的實(shí)驗(yàn)變得更加簡單。


    性價(jià)比--硬件配置高,軟件分析功能強(qiáng)大,技術(shù)參數(shù)優(yōu)秀的計(jì)數(shù)儀往往相比于低配置的參數(shù)價(jià)格高一些,但不能一味追求低價(jià),讓數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性和精確性沒了保障,甚至反而影響我們的實(shí)驗(yàn)進(jìn)度,最后可能面臨重新選擇。所有小薇經(jīng)常在一些用戶細(xì)胞房會發(fā)現(xiàn)在吃灰的低端計(jì)數(shù)儀,面對這些價(jià)格低的儀器選擇要慎重!


    服務(wù)--這里包括售前售后服務(wù)、試用培訓(xùn)、技術(shù)支持,3Q驗(yàn)證服務(wù),以及儀器的質(zhì)保期。萌薇計(jì)數(shù)儀年質(zhì)保,買的放心,用的安心,并在全國主要中心城市有專業(yè)的技術(shù)支持,隨時(shí)響應(yīng)。


    聽了以上的分析,我想大家對選擇一款合適的計(jì)數(shù)儀有一定的心得,不管你是想選擇一體機(jī)還是分體機(jī),明場還是熒光,樣品是常規(guī)培養(yǎng)的細(xì)胞還是粒徑小的微生物樣本,又或者想選一個(gè)高性價(jià)比且服務(wù)有保障的機(jī)器,那么這邊有幾款產(chǎn)品想介紹給大家,總有一款能滿足您的需求。 

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    計(jì)數(shù)儀產(chǎn)品介紹

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      SmartCell 200 Plus


     明場分體機(jī)(連電腦)

     非臺盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)

     臺盼藍(lán)染色活率分析

     人工智能算法

     630萬像素高清成像

     6樣品孔通量

     8秒檢測分析

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    明場一體機(jī)

    非臺盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)

    臺盼藍(lán)染色活率分析

    人工智能算法

    630萬像素高清成像

    6樣品孔通量

    8秒檢測分析

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            SmartCell 600

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           SmartCell 800

    明場+雙熒光一體機(jī)

    AO/PI熒光分析

    非臺盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)

    臺盼藍(lán)活率分析

    GFP/RFP轉(zhuǎn)染分析

    人工智能算法

    630萬像素高清成像

    6樣品孔通量

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           SmartCell 880

    明場+四熒光一體機(jī)

    AO/PI/DAPI/CY5熒光分析

    非臺盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)

    臺盼藍(lán)活率分析

    GFP/RFP轉(zhuǎn)染分析

    人工智能算法

    630萬像素高清成像

    6樣品孔通量

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    明場一體機(jī)

    酵母、小球藻、菌種計(jì)數(shù)

    寄生蟲卵囊計(jì)數(shù)

    血小板、免疫細(xì)胞計(jì)數(shù)

    臺盼藍(lán)染色活率分析

    人工智能算法

    630萬像素高清成像

    6樣品孔通量

    20倍光學(xué)放大

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       SmartCell 900 BF    

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          SmartCell 900 FL

    明場+雙熒光一體機(jī)

    酵母、小球藻、菌種計(jì)數(shù)

    血小板、免疫細(xì)胞計(jì)數(shù)

    雙熒光活率分析

    人工智能算法

    630萬像素高清成像

    6樣品孔通量

    20倍光學(xué)放大

    圖片


    明場+雙熒光一體機(jī)

    AO/PI熒光分析

    臺盼藍(lán)染色分析

    非臺盼藍(lán)細(xì)胞計(jì)數(shù)

    GFP/RFP轉(zhuǎn)染分析

    人工智能算法

    1200萬像素高清成像

    6樣品孔通量


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        Find C     

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    總結(jié)

    當(dāng)大家想擁有一臺合適的計(jì)數(shù)儀時(shí),首先從自身測試的細(xì)胞樣本出發(fā),選擇相對應(yīng)原理的儀器,再參考其核心技術(shù)參數(shù),尤其是成像系統(tǒng)和算法,同時(shí)還要考慮儀器檢測數(shù)據(jù)的可靠性和檢測效率,當(dāng)然,服務(wù)質(zhì)量和質(zhì)保也不能忽視。


    萌薇細(xì)胞計(jì)數(shù)儀不僅能夠滿足多領(lǐng)域、多應(yīng)用場景的計(jì)數(shù)分析,可以對細(xì)胞濃度、活率等細(xì)胞參數(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確檢測;為客戶提供符合FDA21 CFR Part 11要求的安全用戶登錄系統(tǒng)、多級用戶管理權(quán)限及審計(jì)追蹤,還可以為客戶提供3Q驗(yàn)證服務(wù)和方法學(xué)驗(yàn)證,同時(shí)軟件可通過CSV認(rèn)證(計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)認(rèn)證),支持?jǐn)?shù)據(jù)的備份與恢復(fù);儀器具備CE認(rèn)證(安全合格標(biāo)志)和VHP(汽化過氧化氫)滅菌。這些都將為您的細(xì)胞檢測方法建立放心、可靠的計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)。


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